中華人民共和國國家標準 中華人民共和國國家標準 水果、蔬菜制品 GB 12284-90 銅含量的測定——光度法 Fruit and vegetable products—Determination of copper content—Photometric method ——————————————————————————————————————— 本標準等效采用國際標準ISO 3094-1974《水果、蔬菜制品 銅含量的測定——光度 法》 。 1 主題內容與適用范圍 本標準規定了水果、蔬菜制品銅含量測定方法。 本方法適用于水果、蔬菜制品,包括各種醬、泥、果汁和蔬菜汁等銅含量的測定。 注：鉍和碲干擾本方法測定。 2 引用標準 GB 12283 水果、蔬菜及制品中有機物的分解方法 3 原理 樣品中的有機物被分解后,用堿溶液中和分解時的酸溶液試樣中的銅離子與二乙 基二硫代氨基甲酸鈉作用,生成棕黃色絡合物,用或四氯化碳提取銅絡合物, 測定該絡合物的呈色強度。 4 試劑 所有的試劑均為分析純。均使用蒸餾水或相同純度的水。 4.1 或四氯化碳(GB 682或GB 688),無碳酸。 4.2 無水甲醇(GB 683)。 4.3 氨水(GB 631),比重0.88g/mL。 4.4 檸檬酸銨-乙二胺四乙酸鈉鹽溶液 溶解20g檸檬酸銨(Q/HG 12-256)和5g乙二胺四乙酸鈉鹽(GB 1401)于水中并稀釋 至100mL。 4.5 二乙基二硫代氨基甲酸鈉(HG 3-962)溶液5g/L 在25～30℃水浴中加熱可加快試劑溶解。 本溶液應在一周內使用,在冰箱中保存。 4.6 銅標準溶液相當于0.01g/L。 溶解0.196g硫酸銅(CuSO4·5H2O)于水中,加幾滴比重1.84g/mL的硫酸,用水稀釋至 500mL,混勻。再分取10mL,用水稀釋至100mL,本溶液含銅10μg/mL。 4.7 百里酚藍指示劑(C27H2905SNa) 加溫溶解0.1g百里酚藍于8.6mL的0.1 mol/L氫氧化鈉溶液和10mL的96％(υ／υ)乙 醇中,用20％(υ／υ)乙醇稀釋至250mL。 5 儀器、設備 5.1 短頸分液漏斗; 5.2 分光光度計 備有 10或20mm比色杯,在波長435nm測定。 6 分析步驟 6.1 試樣分取和有機物分解 參見GB 12283。 有機物分解前,樣品在磨碎和過篩時應避免使用銅制品設備。 6.2 銅絡合物的形成和提取 預計樣品中銅含量低于50μg時,則使用全部溶液(6.1),預計樣品中銅含量較高時,用水 稀釋溶液(6.1)至100mL并從中適量分取。 分解液冷卻后,用30～40mL水稀釋溶液,把溶液轉入分液漏斗(5.1),依次加入20mL檸檬 酸銨-乙二胺四乙酸鈉鹽(EDTA)溶液(4.4)、5mL氨水溶液(4.3)、2滴百里酚藍指示劑(4.7) 和足量的氨水溶液(4.3),使溶液的顏色由黃變藍(pH8至9.6)。在流水中冷卻,不時的松動 分液漏斗瓶塞。加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液(4.5),準確加入10mL或四氯化 碳(4.1),振搖5min,靜置分層。 用濾紙或脫脂棉擦干分液漏斗。把含銅絡合物的或四氯化碳提取液放到 試管中,避光保存。放置片刻使痕量水分出來,經濾紙過濾到另一試管中以除去痕量水。 加入0.5mL無水甲醇(4.2),測定前在暗處放置2h,在亮處放置1h(避免直射光)。 6.3 空白試驗 按6.1和6.2樣品測定方法同時進行,但不加樣品。 6.4 測定 用分光光度計(5.2),以空白試驗(6.3)為對照,在435nm處測定或四氯化碳提取 液(參見6.2)中銅絡合物的顏色強度。 6.5 標準曲線的繪制 進行有機物分解后,吸取1,2,3,4,5mL銅標準溶液(4.6),分別含10,20,30,40,50μg銅, 同樣按試樣的方法處理,分別進行測定。吸光度值與對應的銅微克數繪制標準曲線。 同時按6.3配制空白溶液并按6.4進行測定。 標準曲線與試樣測定俯錠碘瓜鄢蓋碉睡冬精液同時制備時,無須單獨做空白溶液。 7 結果表示 7.1 計算方法和公式 按標準曲線把6.4的測量值換算成銅的微克數。樣品中銅含量(mg/kg),按下式計算: 100 C 銅(mg/kg)=———×——— υ m 式中:υ——從溶液(6.1)中用于測定的體積,mL; C——標準曲線上查得的銅含量,μg; m——樣品的質量,g。 取兩次算術平均值作為分析結果。 7.2 允許差 同一分析者同時或快速連續進行兩次測定其結果的差異,銅含量小于或等于5mg/kg 時,不超過0.2mg/kg,銅含量更高時,平均值不超過5％。 參考資料：本標準由中華人民共和國農業部提出。