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從培養液中分離雜種細胞的方法和原理{僅限高中知識}

來源:www.bjbfljj.cn???時間:2023-12-03 10:05???點擊:221??編輯:admin 手機版

一、從培養液中分離雜種細胞的方法和原理{僅限高中知識}

方法:根據雜種細胞由什么細胞雜交的,根據雜種細胞擁有的特性配制特定的培養基來提取。

2原理:雜交細胞具有參與雜交的細胞的特性。

二、太陽能電池片加工中的摻雜與擴散原理?

我明白你的意思了。現在工業生產太陽能電池片的硅片,都是P型襯底,意思是之前已經摻雜三族元素了,我們只需要進行磷擴散,就可以形成P-N結。

以n型半導體為底板結構的結晶硅類太陽能電池與以p型半導體為底板的結構相比,前者對雜質的抵抗性更大,在理論上更易提高能量轉換效率。不過,此前許多結晶硅類太陽能電池幾乎都采用以p型半導體為底板的結構。原因是在較厚的p型半導體上能夠形成非常薄的n型半導體層。

德國弗勞恩霍夫太陽能系統研究所(Fraunhofer ISE)宣布,該機構研制的以n型半導體為底板,然后在其上面形成較薄的p型半導體層的單晶硅太陽能電池,其能量轉換效率達到了23.4%。太陽能電池單元面積為2cm見方。

三、酵母雙雜交的原理?

酵母雙雜交系統由 Fields和Song等首先在研究真核基因轉錄調控中建立 i 。典型的真核生長轉錄因子, 如GAL4、GCN4、等都含有二個不同的結構域: DNA結合結構域(DNA-binding domain)和轉錄激活結構域(transcription-activating domain)。前者可識別DNA上的特異序列, 并使轉錄激活結構域定位于所調節的基因的上游, 轉錄激活結構域可同轉錄復合體的其他成分作用, 啟動它所調節的基因的轉錄。

二個結構域不但可在其連接區適當部位打開, 仍具有各自的功能。而且不同兩結構域可重建發揮轉錄激活作用。酵母雙雜交系統利用雜交基因通過激活報道基因的表達探測蛋白-蛋白的相互作用。主要有二類載體: a 含DNA -binding domain的載體; b 含DNA-activating domain的載體。上述二類載體在構建融合基因時, 測試蛋白基因與結構域基因必須在閱讀框內融合。融合基因在報告株中表達, 其表達產物只有定位于核內才能驅動報告基因的轉錄。例如GAL4-bd具有核定位序列(nuclear-localization sequenc

[利用酵母雙雜交篩選基因]

利用酵母雙雜交篩選基因

e), 而GAL4-ad沒有。因此, 在GAL4-ad氨基端或羧基端應克隆來自SV40的T-抗原的一段序列作為核定位的序列。目前研究中常用binding-domain基因有: GAL4(1-147); LexA (E coli轉錄抑制因子)的DNA-bd編碼序列。常用的activating-domain基因有: GAL4(768-881)和皰疹病毒VP16的編碼序列等。

雙雜交系統的另一個重要的元件是報道株。報道株指經改造的、含報道基因(reporter gene)的重組質粒的宿主細胞。最常用的是酵母細胞, 酵母細胞作為報道株的酵母雙雜交系統具有許多優點: 〈1〉 易于轉化、便于回收擴增質粒。〈2〉具有可直接進行選擇的標記基因和特征性報道基因。〈3〉酵母的內源性蛋白不易同來源于哺乳動物的蛋白結合。一般編碼一個蛋白的基因融合到明確的轉錄調控因子的DNA-結合結構域(如GAL4-bd, LexA-bd); 另一個基因融合到轉錄激活結構域(如GAL4-ad, VP16)。激活結構域融合基因轉入表達結合結構域融合基因的酵母細胞系中, 蛋白間的作用使得轉錄因子重建導致相鄰的報道基因表達(如lacZ), 從而可分析蛋白間的結合作用。

酵母雙雜交系統能在體內測定蛋白質的結合作用, 具有高度敏感性。主要是由于:①采用高拷貝和強啟動子的表達載體使雜合蛋白過量表達。②信號測定是在自然平衡濃度條件下進行, 而如免疫共沉淀等物理方法為達到此條件需進行多次洗滌,降低了信號強度。③雜交蛋白間穩定度可被激活結構域和結合結構域結合形成轉錄起始復合物而增強, 后者又與啟動子DNA結合, 此三元復合體使其中各組分的結合趨于穩定。④通過mRNA產生多種穩定的酶使信號放大。 同時, 酵母表型, X-Gal及HIS3蛋白表達等檢測方法均很敏感。

四、超聲波能夠檢測混凝土哪些缺陷?檢測的基本原理是什么?

可以檢測混凝土密實度、內部空洞、裂縫深度、結合面質量、完整性(特別是樁基)等缺陷。

基本原理是:采用超聲波檢測儀,測量超聲脈沖波在混凝土中的傳播速度(簡稱聲速)、首波幅度(簡稱波幅)和接收信號主頻率(簡稱主頻)等聲學參數,并根據這些參數及其相對變化,判定混凝土中的缺陷情況。

詳見《超聲法檢測混凝土缺陷技術規程》CECS21-2000

五、洗滌劑是如何瓦解細胞膜的 說原理

洗滌劑一般分子一般有兩個功能結構。一個親水結構,和水相溶,一個疏水結構,能與細胞膜的脂類相溶,與脂類相溶的結構可以破壞細胞膜。

六、α互補篩選的原理是什么?

載體帶有一個大腸桿菌的DNA的短區段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和前146個氨基酸的編碼信息。在這個編碼區中插入了一個多克隆位點(MCS),它并不破壞讀框,但可使少數幾個氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影響功能,這種載體適用于可編碼β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細胞。因此,宿主和質粒編碼的片段雖都沒有酶活性,但它們同時存在時,可形成具有酶學活性的蛋白質。這樣,lacZ基因在缺少近操縱基因區段的宿主細胞與帶有完整近操縱基因區段的質粒之間實現了互補,稱為α-互補。由α-互補而產生的LacZ+細菌在誘導劑IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在時產生藍色菌落,因而易于識別。然而,當外源DNA插入到質粒的多克隆位點后,幾乎不可避免地導致無α-互補能力的氨基端片段,使得帶有重組質粒的細菌形成白色菌落。這種重組子的篩選,又稱為藍白斑篩選。如用藍白斑篩選則經連接產物轉化的鈣化菌平板37℃溫箱倒置培養12-16hr后,有重組質粒的細菌形成白色菌落。

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